Kit de purificação de RNA viral “Mgpure Viral RNA Purification Kit 20x96” en microplacas de 96

Este kit de amostra 20x96 fornece um método fácil e confiável para isolar o RNA viral total de aspirados ou lavagens de plasma, soro, nasofaringe ou orofaringe, swabs nasofaríngeos ou orofaríngeos, lavagem bronquioalveolar, aspirados traqueais e escarro.

Este procedimento foi testado para isolar ácidos nucleicos de COVID-19, Hepatite A, Hepatite C e HIV. O RNA isolado pode ser usado para PCR, qRT-PCR e outras aplicações subsequentes.

A extração pode ser feita manualmente ou automatizada

Para amostras respiratórias, incluindo: aspirados ou lavagens nasofaríngeas ou orofaríngeas, zaragatoas nasofaríngeas ou orofaríngeas, lavagem broncoalveolar, aspirados traqueais e escarro. As amostras de zaragatoa só devem ser coletadas em zaragatoas com ponta sintética com veios de alumínio ou plástico. Cotonetes com alginato de cálcio ou pontas de algodão com hastes de madeira não são aceitáveis

Também para amostras de soro, plasma ou outras amostras de fluidos corporais.

Conteúdo do kit MR6532-02

    Preparações: 20x96
    20 Placa de amostra de 96 poços e filmes de vedação
    20 placas de eluição
    20 mL de proteinase K 4
    5x250 mL de tampão MYE
    25 ml de MgPure Beads
    4x50 mL de RNA Wash Buffer (Adicione 200 mL de etanol a 96-100% a cada frasco de RNA Wash Buffer antes de usar)
    5x220 mL Tampão RB
    60 mL de ddH2O tratado com DEPC

 

Protocolo (manual)

Protocolo de extração de RNA viral

Pipete 10 µL de Proteinase K e 500 µL de tampão MYE em cada poço da placa de amostra de 96 poços. Nota: Calcule o número de amostras e faça uma mistura principal de proteinase K e tampão MYE.

Adicione 250 µL de amostra a cada poço e misture bem com pipeta. Incubar em temperatura ambiente por 10 min.

Adicione 10 µL de esferas de MgPure a cada poço, misture bem com pipeta e incube à temperatura ambiente por 5 minutos.

Coloque a placa de amostra na grade magnética para magnetizar as esferas MgPure até que elas estejam completamente afastadas da solução.

Retire a solução transparente das contas. Remova a placa de amostra da grade magnética e ressuspenda as esferas com 500 µL de tampão RB. Coloque a placa de amostra na grade magnética para magnetizar as esferas, remova a solução transparente quando as esferas estiverem completamente livres da solução.

Pegue a placa de amostra do rack magnético e ressuspenda as contas com 500 µL de Wash RNA Buffer. Coloque a placa de amostra na grade magnética para magnetizar as esferas, remova a solução transparente quando as esferas estiverem completamente livres da solução.

Seque a amostra ao ar por 5-10 minutos. Pegue a placa de amostra do rack magnético e ressuspenda as esferas com 15-30 µL de H2O tratado com DEPC. Coloque a placa de amostra na grade magnética para magnetizar as esferas, transfira a solução transparente para uma placa de eluição quando as esferas estiverem completamente livres da solução. Armazene o RNA a -20 ℃ ou coloque-o no gelo para aplicações posteriores.

Protocolo (automatizado)

Consulte o manual do usuário.